使用蛋白印跡膜再生液可以對同一張膜進行多次 Western Blot 檢測。在 Western Blot 中完成了一抗二抗結(jié)合和后續(xù)的化學發(fā)光檢測后,有時還需要檢測Actin、Tubulin 等表達量相對穩(wěn)定的蛋白作為參照,或檢測其它蛋白進行比較。通過使用該產(chǎn)品中特殊成份可解離一抗二抗和印跡膜上抗原的結(jié)合,從而去除一抗二抗,即可非常方便地重新利用同一張膜檢測其它蛋白。與重新進行一個 SDS-PAGE 膠,不僅省時省力,而且可以消除重新上樣而帶來的誤差,使可比性更強。本產(chǎn)品中含有β-巰基乙醇。
操作說明
1),將蛋白印跡膜再生液加熱到50 °C。
2),將蛋白印跡膜再生液轉(zhuǎn)移到帶蓋的小塑料盒中,加入的量至少需把膜完全覆蓋。
3),放入膜,50 °C振蕩孵育45 分鐘。
4),棄蛋白印跡膜再生液,在流動的水下沖洗膜1-2 分鐘。
5),在TBST緩沖液中沖洗5 分鐘。
6),進行封閉(blocking)等Western的后續(xù)操作。
保存條件
保存于4 °C,一年有效。
注意事項
1),本產(chǎn)品實質(zhì)是在不影響膜上結(jié)合的抗原的條件下將抗體洗脫下來,實際操作中,膜類型、抗體類型、濃度及抗原特性都影響洗脫難易度。
2),適用于 ECL 和類似的化學發(fā)光試劑進行的 Western 檢測。不適用于非化學發(fā)光試劑進行的 Western 檢測,例如 DAB,NBT/BCIP。
3),本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
4),為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。